Карповские чтения 2004

МЕТОДЫ ИММУНОМОРФОЛОГИИ В ИЗУЧЕНИИ ГИСТОГЕНЕТИЧЕСКИХ ПРОЦЕССОВ РАННЕГО КАРДИОГЕНЕЗА Н.И.Горелова, Ю.В.Силкина Кафедра гистологии Днепропетровская государственная медицинская академия (Днепропетровск)

В настоящее время иммуногистохимические методы исследования получили широкое распространение в изучение гистогенетических процессов кардиогенеза в связи с их высокой чувствительностью и информативностью, что в сочетании с рутинными методами окраски парафиновых срезов позволяет морфологам более специфично интерпретировать препарат, количественно оценивать процессы клеточного роста, изучать с помощью моноклональных антител процессы пролиферации и апоптоза.

Цель нашего исследования продемонстрировать перспективность и целесообразность внедрения иммуногистохимических методов диагностики в изучении гистогенетических процессов раннего кардиогенеза.

Для изучения процессов васкулогенеза мы использовали цитоспецифичный маркер CD34 (лейкоцитарный антиген), из тканеспецифичных маркеров виментин, который является промежуточным филаментом белка, накапливающегося в тканях, происходящих из мезенхимы. Для оценки процесса пролиферации мы использовали маркер Кі-67, который выявляет пролиферирующие клетки, находящиеся на разных фазах клеточного цикла, и т.о. отражает весь пул делящихся клеток. Это наиболее надежный и четкий маркер пролиферации. Все иммуногистохимические реакции проводились на парафиновых срезах сердец эмбрионов (8-я неделя) и плодов (9-я неделя) человека, с использованием системы визуализации LSAB (Labelled StreptavidinBiotin) (трехступенчатая).

На 8-й недели эмбрионального развития человека мы наблюдали хорошо выраженную васкуляризацию компактного миокарда, в котором ближе к эпикарду определяются хорошо развитые сосуды, разного диаметра, в просвете, которых находятся форменные элементы крови. В трабекулярном миокарде мы наблюдали иммуногистохимическое окрашивание клеток, меченных маркером CD34, которые еще не образуют хорошо различимые сосуды, но пронизывают кардиомиоциты в виде межклеточных тяжей. По-видимому, это та стадия развития эмбриональной сосудистой сети, когда веретеноподобные мезенхимные клетки дифференцируются в направление примордиальных эндотелиоцитов, которые соединяются между собой плотными контактами, и образуют единый клеточный пласт, дающий начало сосудистой стенке. Наши исследования продемонстрировали хорошо развитую васкуляризацию межжелудочковой перегородки (МЖП), которая имеет компактное строение. Начиная с 9-й недели плодного периода мы наблюдали в трабекуле, как отдельные тяжи эндотелиальных клеток, так и сформированные уже сосуды.

На 8-й неделе эмбрионального развития в стенке миокарда предсердий мы не наблюдали экспрессии виментина, он экспрессировался только в эндокарде. Иммуногистохимическое окрашивание виментина в МЖП наблюдалась нами в большей степени в ее центральной части, по сравнению с право и левожелудочковой сторонами. Оценивая зональное накопление виментина в сердце на 8-9-й неделях пренатального развития человека, мы получили большую степень экспрессии в компактном миокарде.

На 8й недели эмбрионального развития человека мы наблюдали активные процессы пролиферации в центральной и базальной частях МЖП, где часть Кі67–позитивных клеток окрашивались в коричневый цвет. В стенке левого желудочка мы наблюдали более высокую пролиферативную активность, чем в стенке правого желудочка, но меньше, чем в базальной части МЖП. Процессы пролиферации более активны в компактном миокарде, что находится ближе к эпикарду. Высокая пролиферативная активность отмечалась вокруг крупных сосудов, что объясняется формированием оболочек сосудов. Пролиферативная активность в предсердиях больше была выражена в эндокарде по сравнению с миокардом.

Высокая степень экспрессии маркеров CD34, виментина, Ki67 на 89й неделях пренатального развития человека свидетельствует о более активных процессах тканевой дифференцировки в компактном миокарде по сравнению с трабекулярным миокардом.

// Карповские чтения: Материалы I Всеукраинской научной морфологической конференции (Днепропетровск, 18-21 мая 2004 г.).
Под ред. профессора И.В.Твердохлеба.- Днепропетровск: Пороги, 2004. - 75с. [содержание...]